Collection●Culture● Dipstick● Biochemistry Collection نمونه ادرار اقایان بهترین نمونه جهت تشخیص عفونت های ادراری اولین ادرار صبحگاهی است. ۲. پیش از انجام آزمایش از نوشیدن بیش از حد مایعات اجتناب نمایید .۳ آلت تناسلی خود را با آب و صابون شسته و با دستمال کاغذی خشک نمائید. ۴ درب ظرف استریل کشت ادرار را با احتیاط باز کنید مواظب باشید که دستها با سطح داخل ظرف تماس پیدا نکند .۵ قسمت اول ادرار (حدود ۲ ثانیه را داخل توالت تخلیه نموده و سپس حدود ۳۰ میلی ليتر نصف ظرف نمونه را داخل ظرف استریل جمع آوری کنید .۶ درب ظرف را بسته و آن را در جای مخصوص نمونهها قرار دهید ۷ در صورتیکه نمونه در خارج از آزمایشگاه تهیه میشود حداکثر تا یک ساعت تحویل آزمایشگاه نمائید و تا زمان تحویل به آزمایشگاه در یخچال نگهداری کنید. ۸. در صورت مصرف آنتی بیوتیک به پذیرش آزمایشگاه اطلاع دهید. توجه شما به نکات فوق باعث افزایش صحت و دقت در جواب آزمایش خواهد شد. نمونه ادرار خانمها مشخصات ثبت شده بر روی برچسب نمونه را کنترل نموده و صحیحی بودن آن اطمینان حاصل فرمایید. ۲. پیش از انجام آزمایش از نوشیدن بیش از حد مایعات اجتناب نمایید ۳ نمونه ادرار را فقط در ظرف یکبار مصرف و استریل که آزمایشگاه در اختیارتان قرار میدهد جمع آوری نمائید ۴ پیش از انجام آزمایش از نوشیدن بیش از حد مایعات خودداری فرمایید .۵ ابتدا دست خود را با آب و صابون شستشو دهید ، قسمت خارجی دستگاه تناسلی را با آب شسته ودقت فرمائید به خوبی و با آب فراوان این کار انجام شود کمی منتظر بمانید تا خشک شود . . .۶ قسمتهای خارجی دستگاه تناسلی را با یک دست نگه داشته سپس قسمت اول ادرار خود را دور بریزید و وسط ادرار را حداقل ۳۰ میلی لیتر نصف ظرف ) درون ظرف بریزید. ۷. درب ظرف را بسته و در محل مخصوص در آزمایشگاه قرار دهید .۸ بهتر است ادرار اول صبح راجهت کشت ادرار جمع آوری کنید. 9. شب قبل از آزمایش از پماد و شیاف واژینال استفاده نکنید. ۱۰. نباید نمونه ادرار در زمان قائدگی جمع آوری گردد. ۱۱. وجود خونریزی غیر از قائدگی را قبل از انجام آزمایش به پذیرش ازمایشگاه اطلاع دهید. ۱۴. اگر از آنتی بیوتیک ، پماد ، کرم و یا داروی خاصی استفاده میکنید قبل از نمونه گیری آزمایشگاه را مطلع سازید .۱۳ جهت انجام کشت های میکربی از جمله کشت ادرار می بایست حداقل یک هفته از آخرین مصرف داروی آنتی بیوتیک گذشته باشد مگر در مواردی که با اطلاع پزشک معالج بیمار می باشد. نمونه ادرار کودکان نمونه ادرار طفل را فقط داخل کیسه ادرار متناسب با جنسیت کودک جمع آوری نمایید . این کیسه کاملا استریل بوده و یکبار مصرف می باشد . ۲. مشخصات ثبت شده بر روی برچسب را به دقت کنترل نمایید. ۳ منطقه تناسلی طفل را با آب و صابون بچه بطور کامل شسته و از جلو به عقب خشک نمایید . پوست این ناحیه نمی بایست حاوی روغن ، پودر یا لوسیون یا آلوده به مدفوع باشد . ۴. کیسه اصلی را از داخل پوشش آن بیرون آورده پس از جدا نمودن کاغذ بر چسب آن و در حالیکه پاهای بچه را از هم باز کردهاید قسمت چسبناک کیسه را با دقت اطراف مجرای ادراری بچسبانید. مطمئن شوید که روکش چسب بطور کامل و محکم بدون هیچ چروکی به پوست چسبیده است طوریکه که مجرای ادرار داخل سوراخ کیسه قرار گیرد . ۵. برای دخترها بهتر است عمل چسباندن کیسه از پایین به بالا صورت پذیرد تا مجرای ادرار کامل در قسمت سوراخ کیسه قرار گرفته و ادرار بیرون ریخته نشود. .۶ هر ۱۵ دقیقه ورود ادرار به کیسه را کنترل کنید به محض جمع آوری نمونه، کیسه را جدا و پس از تا زدن قسمت فوقانی بر چسب شخصات را بر روی آن نصب کنید . . توجه: در هنگام خواب راحت تر میتوان به کودک کیسه نصب کرد . توجه : نمونه ادرار حداکثر تا ۱ ساعت بعد از جمع آوری به آزمایشگاه تحویل داده شود • نمونه ادرار ۲۴ ساعته نمونه ادرار را فقط در ظرف مخصوص آزمایشگاه جمع آوری نمایید . ۲ هنگام صبح در ساعت معینی ادرار کرده و آن را مطابق معمول دور بریزید و دقیقا از این ساعت جمع آوری ادرار را آغاز نموده و در تمامی دفعات تخلیه ادرار را در ظرف مربوطه انجام دهید و درست در ساعتی که روز قبل ادرار را دور ریخته اید مثانه خود را به طور کامل تخلیه نموده و ادرار را داخل ظرف بریزید. در طول این ۲۴ ساعت به هیچ وجه قطره ای از ادرار را دور نریزید مثال رأس ساعت ۷ صبح امروز ادرار خود را دور ریخته و آن را در توالت تخلیه نمایید و سپس تا ساعت تا ۷ صبح فردا ۲۴) ساعت کامل تمامی دفعات تخلیه ادرار را در ظرف مخصوص انجام دهید • . در طول مدت ۲۴ ساعت در صورت نیاز به دفع مدفوع ادرار خود را در این حالت نیز جمع آوری نمایید . ۴. با توجه به اینکه مدت زمان لازم جهت جمع آوری نمونه این آزمایش یک روز کامل است به محدودیتهای زمانی خود و تعطیلات توجه فرمایید. ۵. ممکن است ظرف تحویل داده شده به شما از سوی آزمایشگاه حاوی مایع و یا پودر محافظ و نگهدارنده باشد لطفا به هیچ وجه به آن دست نزده و یا آن را دور نریزید . .۶ در طول مدت نمونه گیری ظرف حاوی ادرار را در محل خنک یخچال نگهداری نمایید. ۷. از آلوده نمودن سطوح خارجی ظرف و یا شستن ظرف با آب جدا خودداری نمایید ظرف ادرار ۲۴ ساعته را به محض اتمام نمونه گیری به آزمایشگاه تحویل دهید -راس ساعت مشخص مثلا) ساعت ۸ صبح ادار دفع شده و دور ریخته شود و بعد ازان طی ۲۴ ساعت (یعنی تا ۸ صبح روز بعد تمام دفعات ادرار دفع شده در گالن مخصوص آزمایشگاه جمع آوری گردد بدین معنی که آخرین نمونه ادرار ساعت ۸ صبح روز بعد نیز جمع آوری شود در تمام مدت ۲۴ ساعت ، گالن باید در محل خنک و به دور از نور مستقیم قرار گیرد در حین و قبل از جمع آوری ادرار از ورزش و مصرف مایعات زیاد خودداری شود. در صورت ابتلا به عفونت ادراری، بیماری حاد یا در شرایط پس از جراحی که امکان دارد در نتایج آزمایش تداخل ایجاد کنند موارد را حتما به پزشک معالج و مسئول آزمایشگاه اطلاع دهید امکان دارد گالن هایی که جهت جمع آوری ادرار ۲۴ ساعته از طرف آزمایشگاه در اختیار شما قرار می گیرد حاوی مواد نگهدارنده مایع یا جامد باشند نباید تحت هیچ شرایطی این مواد را خالی کرد و از بو کردن یا تماس آنها با دست جدا خودداری شود ارجح است نمونه ادرار مستقیما بداخل گالن ریخته نشود و از ظرف های کوچکتر تمیز برای این کار استفاده شود. - بعد از آوردن گالن ادرار ۲۴ ساعته زمان آماده شدن جواب آزمایش را از متصدی پذیرش بپرسید. نمونه سیتولوژی ادرار دومین ادرار صبحگاهی بهترین نمونه جهت جمع آوری است برای نمونه گیری سه نوبته در سه روز متوالی اقدام شود زیرا بیشترین امکان تشخیص را دارد - قبل از نمونه گیری مصرف مایعات به میزان کافی توصیه شده است تا ۳ ساعت قبل از نمونه گیری ۶ لیوان آب بنوشید. Urine 24hrs preservatives نمونه کشت ادرار بهترین نمونه اولین ادرار صبحگاهی است که حداقل ۸ ساعت در مثانه باقی مانده و تغلیظ شده باشد در غیر این صورت، میتوان از نمونه های ادرار تصادفی استفاده نمود بیمار نباید در ۷۲ ساعت گذشته آنتی بیوتیک مصرف کرده باشد ) مگر با تجویز پزشک معالج برای جمع آوری نمونه درظرف ادرار ، موضع را با پنبه آغشته به محلول شامپو رقیق شستشو داده و خوب آبکشی نمایید. در پوش ظرف استریل مخصوص جمع آوری ادرار را باز کنید و مراقب باشید تا لبه و سطح داخلی ظرف با انگشتان و بدن شما تماس پیدا نکند. قسمت اول ادرار را دور بریزید و بدون توقف جریان ادرار ، قسمت میانی آن را داخل ظرف استریل مخصوص جمع آوری کنید. سعی شود حداقل به میزان نصف ظرف ادرار جمع آوری شود و در پوش ظرف را روی آن قرار دهید و کاملا سفت کنید برای جمع آوری نمونه در افرادی که سوند اداری دارند در مواری که از سوندهای ادراری طولانی مدت استفاده می شود، لازم است ابتدا سوند را قبل از محل اتصال به لوله کیسه ادراری با یک پنس مسدود نمایید. حدود نیم تا یک ساعت بعد لوله کیسه ادرار را جدا و محل اتصال را با الکل تمیز کنید و پس از خروج مقداری ادرار ، باقی نمونه را در ظرف استریل مخصوص جمع آوری نمایید. نمونه ادرار نباید از کیسه سوند ادراری برداشته شود برای جمع آوری نمونه جهت کشت ادرار در نوزادان و کودکان زیر دو سال باید از کیسه های استریل شده مخصوص جمع آوری ادرار (urine) bag که متناسب با جنس کودک ) دخترانه یا پسرانه ) است استفاده شود این کیسه نباید بیش از ۴۵ دقیقه به مجرای ادرار متصل باشد و بعد ازجمع آوری حدود ۱۰-۱۵میل لیتر ادرار ، کیسه با دقت از محل اتصال جدا شود و داخل ظرف استریل کشت ادرار قرار گیرد. ============================ گزارش کشت منفی :R1 Culture result: No Bacteria growth (<10² CFU/ mL) at 24 hours No comment ======================= :R2 Culture results: No Bacteria growth (<10² CFU/mL) at 48 hours Comment 2:Reasons of bacteria presence in urinalysis (without pyuria and UTI clinical symptoms) and false negative culture result can be as follow: Contamination during sampling, delay in sam- ple transport, presence of fastidious or anaerobic normal flora bacteria such as Lactobacilli, antibi- otic therapy, use of disinfection material or inter- fering substances during sampling, asymptomatic bacteriuria with anaerobic or fastidious bacteria, transient colonization with anaerobic bacteria. ========================== : R3 Culture results: No Bacteria growth (<10² CFU/mL) at 48 hours. Comment 3:Reasons of false negative culture despite of UTI clinical symptoms can be as follow: Antibiotic therapy, use of disinfection material or interfering substances during sampling, delay in sample transport, presence of anaerobic or presumed urethral syndrome agents such as Chlamydia, Gonorrhea or Ureaplasma, prostate infection possibility (in men), viral etiolo gy (e.g. Cytomegalovirus, Adenovirus type II and 11 or Herpes Simplex Virus), and non-infectious conditions such as the presence of kidney stones. Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory and urogenital and prostate (in males)/Vaginal (in females) cultures are recommended. ================================ : R4 Culture result: No Bacteria growth (<10² CFU mL) at 48 hours. Comment 4:Reasons of false negative culture despite of pyuria presence can be as follow: Antibiotic therapy, use of disinfection material or interfering substances during sampling, delay in sample transport, sterile pyuria, sexually transmitted diseases (STDs) such as Chlamydia, Gonorrhea, Mycoplasma and Trichomonas, viral infections such as Adenovirus, BK Polyomavirus, and Cytomegalovirus, interstitial cystitis, pelvic infections or intra-abdominal infections,urinary fistulas, kidney stones, tuberculosis, au- toimmune diseases such as Kawasaki disease, polycystic kidney disease and long-term use of the following drugs: antibiotics with penicillin, nitrofurantoin, aspirin, diuretics, olsalazine and non-steroidal non-inflammatory drugs, such as ibuprofen (Advil, Motrin). Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory and urogenital and prostate (in males)/Vaginal (in females) cultures are recommended. =========================== :R5 Results: No Bacteria and Fungi (Yeast) growth (<10² CFU/mL) at 48 hours. Comment 5:Reasons of negative culture result despite of Yeast presence in urinalysis can be anti-fungi therapy. Cultures of sample will be maintained for 14 days and probable growth will be reported. Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory and vaginal culture are recommended. ======================= گزارش کشت مثبت بدون پیوری :R6 Culture result: Growth of X CFU/mL (or <10⁴ CFU/mL) of a Gram-Negative Bacilli. Comment 6: Most probable reasons of bacteria growth without pyuria and UTI clinical symp- toms can be contamination (perinea contact), colonization (Foley catheter) or transient in- fection. Culture plates will be hold for 72 hours more for consultation. ======================== :R7 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacterium Y (probable contamination, colonization or transient infection because of absence of UTI clinical symptoms and pyuria) + Antibiogram. Comment 7:Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory is recommended. ======================== :R8 Culture result: Growth of >10⁵ CFU/mL of Bacterium Y (probable contamination, colo- nization or transient infection because of ab- sence of UTI clinical symptoms and pyuria) + Antibiogram. Comment 8: Most probable reason of ≥10⁵ CFU/mL bacteria growth without UTI clinical symptoms can be asymptomatic bacteriuria. Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory is recommended ========================= :R9 Culture result: Growth of two different Bacteria in two samples (the most possibility of contamination, colonization or transient infection) Comment 9:Culture plates will be hold for 72 hours more for consultation ========================= :R10 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacterium Y (confirmed by two samples) + Antibiogram Comment 10: Sample repeating after one week is recommended for follow-up ======================== :R11 Culture result: Growth of >10⁵ CFU/mL of Bacterium X (confirmed by two samples) + Antibiogram Comment 11: Most probable reason of ≥10⁵ CFU/mL bacteria growth without UTI clinical symptoms can be asymptomatic bacteriuria ========================= :R12 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacterium Y (probable contamination, colonizition or transient infection because of pyuria absence) + Antibiogram Comment 12: Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory and urogenital and prostate (in males)/Vaginal (in females) cultures are recommended ========================= :R13 Culture result: Growth of two different Bacteria in two samples (the most possibility of contamination, colonization or transient infection Comment 13: Reasons of UTI clinical symp- toms can be as follow Antibiotic therapy, use of disinfection material or interfering substances during sampling, delay in sample transport, presence of anaerobic or presumed urethral syndrome agents such as Chlamydia, Gonorrhea or Ureaplasma, prostate infection possibility (in men), viral etiology (e.g. Cytomegalovirus, Adenovirus type II and 11 or Herpes Simplex Virus), and non-infectious con- ditions such as the presence of kidney stones If there is strong clinical evidence of infection possibility, urine collection by catheter or suprapubic aspirate is recommended. The urogenital and prostate (in males)/Vaginal (in females) cultures are recommended. Culture plates will be hold for 72 hours more for consultation ========================= :R14 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacterium Y (confirmed by two samples)+ Antibiogram. Comment 14: Most probable reasons of <10⁵ CFU/mL bacteria growth can be as follow: Antibiotic therapy, use of disinfection material or interfering substances during sampling, frequent voiding, fluid intake and patient in the early development of an UTI. ========================== :R15 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacterium Y (confirmed by two samples) + Antibiogram. ========================= گزارش کشت مثبت با پیوری :R16 Culture result: Growth of two different Bacteria in two samples (the most possibility of contamination, colonization or transient infection) Comment 16: Reasons of pyuria presence can be as follow Serile pyuria, sexually transmitted diseases (STDs) such as Chlamydia, Gonorrhea, Mycoplasma and Trichomonas, viral infections such as Adenovirus, BK Polyomavirus, and Cytomegalovirus, interstitial cystitis, pelvic infections or intra-abdominal infections, urinary fistulas, kidney stones, tuberculosis, autoimmune diseases such as Kawasaki disease, polycystic kidney disease and longterm use of the following drugs: antibiotics with penicillin, nitrofurantoin, aspirin, diuretics, olsalazine and non-steroidal non-inflammatory drugs, such as ibuprofen (Advil, Motrin) The urogenital and prostate (in males)/Vaginal (in females) cultures are recommended. Culture plates will be hold for 72 hours more for consultation =============================== :R17 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacterium Y (probable contamination, colonization or transient infection because of <10⁴ bacteria growth) + Antibiogram. Comment 17: Most probable reasons of <10⁵ CFU/mL bacteria growth can be as follow: Antibiotic therapy, use of disinfection material or interfering substances during sampling, frequent voiding, fluid intake and patient in the early development of an UTI. Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory is recommended. =========================== گزارش رشد بیش از دو باکتری یا رشدفلور طبیعی : R18 Culture result: Growth of multiple organisms (>2 types of bacteria and therefore the most possibility of gross contamination Comment 18 : Culture plates will be hold for 72 hours more for consultation =========================== R19 Culture result: Growth of multiple organisms (>2 types) with no predominate organism (colony count <104 CFU/mL and therefore the most possibility of gross contamination Comment 19 :Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory is recommended. Culture plates will be hold for 72 hours more for consultation ============================= :R20 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacteria Y + Antibiogram Comment 20 : Because of growth of N other bacteria (colony count <10⁴ CFU/mL), there is possibility of gross contamination. Appro- priate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory is recommended ============================ :R21 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bacteria Y (confirmed by two samples) + Antibiogram Comment 21 : Growth of N other bacteria (col- ony count <104 CFU/mL and therefore the most possibility of contamination) ========================= R22 Culture result: Growth of X CFU/mL of a Co- agulase-Negative Staphylococcus sp. (or al- pha-haemolytic Streptococcus, Lactobacillus sp. or Corynebacterium sp.) as urogenital nor- mal flora (the most possibility of gross contamination Comment 22: Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely deliv- ery to laboratory and urogenital and prostate (in males)/Vaginal (in females) cultures are recom- mended. Culture plates will be hold for 72 hours more for consultation ============================ R23 Culture result: Growth of X CFU/mL of Bac- terium Y + Antibiogram Comment 23 : Bacterium Y is a urogenital nor- mal flora and therefore there is possibility of contamination or colonization. Appropriate recollection of sample after at least 24 hours in sterile condition with timely delivery to laboratory is recommended ============================= R24 Culture result: Growth of multiple urogenital normal flora bacteria (the most possibility of gross contamination or colonization Dipstick تست اسید سولفوسالیسیلیک هدف : شناسایی پروتئین در ادرار چند نوع اسید هستند که میتوان از آنها برای رسوب پروتئین استفاده کرد از جمله اسید سولفوسالیسیلیک ، تری کلرو استیک اسید اسید نیتریک و اسید استیک اسید سولفوسالیسیلیک متداولترین تست اسیدی مورد استفاده است زیرا احتیاج به استفاده از حرارت ندارد. در روشی که در اینجا بحث شده است از محلولی با عنوان معرف Extons استفاده میگردد که محلول ۵% اسید سولفوسالیسیلیک در محلول سولفات سدیم می باشد. افزودن سولفات سدیم به اسید سولفوسالیسیلیک باعث میشود که رسوب یکدست و یکنواخت تری تشکیل گردد این روش حساس تر از نوار ادراری است و برای همه پروتئینها از جمله آلبومین ، گلوبولین ها ، گلیکوپروتئینها و پروتئین بنس جونز اختصاصی می باشد. بدین دلیل این روش اغلب همزمان با تست غربالگر نوار ادراری انجام می گیرد. تهیه معرف Extons ۸۸۰ گرم سولفات سدیم را در ۶۰۰ میلی لیتر آب مقطر با استفاده از حرارت حل کنید. سپس سرد کنید و بعد ۵۰ گرم اسید سولفوسالیسیلیک به آن اضافه نمایید و حجم را به ۱۰۰۰ میلی لیتر برسانید. روش انجام آزمایش -۱ مقداری از ادرار را سانتریفوژ کرده و از محلول رویی استفاده کنید. - حجم های مساوی از محلول رویی و معرف Extons را با یکدیگر مخلوط کنید. براساس کدورت بدین ترتیب درجه بندی کنید جواب منفی (N) : بدون کدورت جزئی (Trace) : زمانیکه کدورت در مقابل یک زمینه مشکی قابل ملاحظه است. • یک مثبت :(۱) کدورت مشخص است اما دانه دانه نیست. دو مثبت (۲) کدورت مشخص و دانه دانه می باشد. • دو مثبت :(۳) کدورت شدید و همراه با توده های مجزا است. دو مثبت :(۴) کدورت تیرگی خاصی دارد و با توده های بزرگ که ممکن است سفت و یکپارچه شده باشد همراه است. تست حلقه هلر هدف: شناسایی پروتئین در ادرار این روش هنگامیکه فقط مقدار کمی ادرار در دسترس است ممکن است مفید واقع شود اما حساسیت این تست به اندازه سایر تست های رسوبی نیست همچنین بیان نتایج به صورت نیمه کمی بسیار مشکل است. روش انجام آزمایش -۱ چند میلی لیتر اسید نیتریک غلیظ را در ته یک لوله آزمایش بریزید. ۲- ادرار سانتریفوژ شده را به آرامی از کنار لوله اضافه کنید به طوری که ۲ لایه مایع تشکیل شود رسوب سفید که در محل تماس ادرار و اسید در عرض ۳ دقیقه ظاهر میشود نشانگر حضور پروتئین است. تست رسوبی گرما هدف : شناسایی پروتئین در ادرار پروتئین بنس - جونز در درجه حرارت های بین ۴۰-۶۰ درجه سانتیگراد رسوب می کند ولی مجددا در حرارت ۱۰۰ درجه سانتیگراد حل می شود با سرد کردن ،مجدد رسوب دوباره در حدود ۶۰ درجه سانتیگراد ظاهر شده و مجددا در حرارت پایین تر از ۴۰ درجه سانتیگراد حل خواهد شد. روش انجام آزمایش -۱ چند میلی لیتر ادرار سانتریفوژ شده را در یک لوله آزمایش ریخته و PH آن را با استفاده از اسید استیک ۱۰ درصد تا حدود ۵/۵ اسیدی نمائید. - لوله را در بن ماری ۵۶ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه حرارت دهید اگر رسوبی مشاهده شد دلیل بر وجود پروتئین بنس - جونز است. ۳- - اگر رسوب مشاهده شد لوله را در بن ماری جوش قرار داده و اجازه دهید که به مدت ۳ دقیقه بجوشد کاهش رسوب دال بر وجود پروتئین بنس - جونز میباشد. به علاوه افزایش رسوب به واسطه سایر پروتئینها نیز ایجاد می گردد. -۴- اگر افزایش رسوب در ۱۰۰ درجه سانتیگراد ملاحظه گشت ادرار را در حالیکه هنوز داغ است به منظور جدا کردن پروتئین های مداخله کننده ، صاف نمائید پروتئین بنس - جونز در آن دما محلول خواهد بود و در نتیجه در صاف شده باقی می ماند. -۵- با سرد کردن ادرار ، پروتئین بنس - جونز مجددا در ادرار صاف شده در دمای حدود ۶۰ درجه سانتیگراد ظاهر خواهد شد و در حرارت پایین تر از ۴۰ درجه سانتیگراد مجددا حل می گردد. تست بندیکت هدف : شناسایی گلوکز در ادرار تست بندیکت مدتهای زیادی است که یک روش استاندارد برای تعیین گلیکوزوری محسوب میگردد اگرچه که برای گلوکز اختصاصی نیست اصول واکنش عبارت است از تبدیل معرف سولفات مس قلیایی آبی رنگ به رسوب اکسید کوپروس قرمز رنگ در نتیجه احیا شدن تهیه معرف سولفات مس ۱۷/۳گرم • سیترات سدیم یا پتاسیم ۱۷۳ گرم • کریستالهای کربنات سدیم : ۲۰۰ گرم یا کربنات سدیم بدون آب ۱۰۰ گرم سیترات و کربنات را در حدود ۷۰۰ میلی لیتر آب مقطر به کمک گرما حل کرده و صاف کنید سولفات مس را در ۱۰۰ میلی لیتر آب داغ حل • کرده و در محلول سیترات - کربنات ،ریخته تکان دهید. قبل از اینکه حجم آن را با آب مقطر به ۱۰۰۰ میلی لیتر برسانید اجازه دهید که خنک شود. روش انجام آزمایش ۱- ۵ میلی لیتر از محلول را در لوله آزمایش بریزید. قطره ادرار اضافه کرده و به خوبی مخلوط نمائید. -۳- به مدت ۵ دقیقه در حمام آب جوش قرار دهید و در این مدت چند بار لوله را تکان دهید یا به مدت ۲-۱ دقیقه روی شعله آن را بجوشانید. -۴- اجازه دهید به آهستگی سرد شود. نتایج آزمایش برحسب شدت رنگ به صورت زیر طبقه بندی می شود جواب منفی (N) : رنگ آبی ،روشن رسوب آبی رنگ نیز ممکن است تشکیل شود. جزئی (Trace) : رنگ سبز مایل به آبی • یک مثبت (۱) رنگ سبز، رسوب سبز یا زرد • دو مثبت :(۲) رنگ زرد تا سبز رسوب زرد • سه مثبت (۳) رنگ زرد تا نارنجی ، رسوب زرد تا نارنجی • چهار مثبت :(۴) رنگ زرد مایل به قرمز رسوب قرمز یا قرمز آجری تست روترا هدف: شناسایی کتون در ادرار آزمایش ،روترا آزمایش حلقه نیتروپروسید است که به دی استیک اسید بسیار حساس میباشد ولی به استون حساسیت کمتری دارد. بتا هیدروکسی بوتیریک اسید به وسیله این آزمایش مشخص نمی شود. این روش میتواند در حدود ۵-۱ میلی گرم درصد دی استیک اسید و ۲۵-۱۰ میلی گرم درصد استون را مشخص نماید. تهیه معرف • معرف :روترا ۷/۵ گرم از نیتروپروسید سدیم را با ۲۰۰ گرم سولفات آمونیوم ساییده و مخلوط کنید. روش انجام آزمایش -۱ در حدود ۱ گرم معرف روترا را به ۵ میلی لیتر ادرار در یک لوله آزمایش اضافه کرده و به خوبی مخلوط کنید. -۲- با یک میلی لیتر هیدروکسید آمونیوم غلیظ سطح آن را بپوشانید. ۳- اگر یک حلقه -قرمز ارغوانی در طی ۱/۵ دقیقه در نقطه تماس ایجاد شد نتیجه ، مثبت است بدین ترتیب درجه بندی کنید جواب منفی (N) : حلقه ای ایجاد نشده است یا حلقه قهوه ای می باشد. • یک مثبت (۱) حلقه ارغوانی - صورتی کم رنگ دو مثبت :(۲) حلقه باریک ارغوانی تیره • سه مثبت :(۳) حلقه پهن ارغوانی تیره هماتست هدف : شناسایی خون در ادرار محلول یا قرصهای هماتست برای ادرار نیز قابل استفاده هستند هرچند که معمولا از آنها برای تشخیص خون مخفی در نمونه های مدفوع استفاده می شود. معرفهای استفاده شده در آنها عبارتند از: اسید تارتاریک ، استات کلسیم ، پراکسید استرونتیوم و اورتوتولوئیدین رنگ زا. هنگامیکه قرص هماتست با آب مرطوب میشود، معرف ها به سمت پایین شسته شده و روی کاغذ صافی محتوی نمونه قرار می گیرند تارتاریک اسید و استات کلسیم با پراکسید استرونتیوم واکنش داده تا پراکسید هیدروژن به دست آید. هموگلوبین در ادرار پراکسید هیدروژن را تجزیه کرده و اکسیژن آزاد به وجود میآورد که سبب اکسید شدن اورتولوئیدین و تغییر آن به یک مشق با رنگ آبی می گردد. این روش وقتی که برای تشخیص خون مخفی در ادرار استفاده شود بسیار غیر حساس است و قادر نخواهد بود کمتر از ۲۰۰ گلبول قرمز در یک زمینه با بزرگنمایی بالا را به طور موثقی تشخیص دهد مگر آنکه تعدادی از این سلولها همولیز شده باشند این روش به هموگلوبین آزاد حساسیت بیشتری دارد و میتواند مقدار هموگلوبینی را که از همولیز ۳۰-۲۵ گلبول قرمز در یک زمینه با بزرگنمایی زیاد به دست آمده است را ثبت نماید. روش انجام آزمایش: -۱- یک قطره ادرار را روی کاغذ صافی میگذاریم. -۲- یک قرص را در مرکز ناحیه مرطوب شده کاغذ صافی قرار می دهیم. ۳- یک قطره آب روی قرص اضافه میکنیم ۱۰-۵ ثانیه صبر می نماییم، سپس دومین قطره آب را روی قرص می ریزیم بدین ترتیب آب در اطراف قرص روی کاغذ صافی نفوذ می کند. -۴- اگر آزمایش مثبت باشد یک رنگ آبی روی کاغذ صافی اطراف قرص در عرض مدت ۲ دقیقه ظاهر خواهد شد شدت رنگ بستگی به تعداد گلبولهای ،قرمز هموگلوبین یا میوگلوبین دارد اما بیان نتایج به صورت نیمه کمی مشکل است به همین دلیل جواب به صورت مثبت یا منفی گزارش میشود. ایکتوتست هدف : شناسایی بیلی روبین در ادرار ایکتوتست تستی است که توسط قرص انجام میشود و بر اساس همان واکنش مشابه دیازو در نوار ادراری است اما خیلی حساس تر از نوار بوده و قادر به تشخیص مقادیر خیلی کم بیلی روبین در ۰/۱ - ۰/۰۵ میلی گرم درصد می.باشد به علت این حساسیت ، ایکتوتست به عنوان یک روش پیشنهادی زمانیکه تنها یک تست برای بیلی روبین درخواست میشود میباشد. همچنین این تست به عنوان یک روش مناسب برای تأیید نتیجه مثبت حاصل از روش نوار ادراری به کار می رود. قرص شامل معرفهای زیر است پارانیتروبنزن دیازونیوم ، پارا تولوئن سولفونات اسید سولفوسالیسیلیک ، بی کربنات سدیم و اسید بوریک صفحه ای که روی آن آزمایش انجام میشود از مخلوط سلولز و نخ نسوز ساخته شده .است وقتی که ادرار روی این صفحه قرار داده می شود، خاصیت جذب این صفحه باعث میشود که بیلی روبین روی سطح خارجی صفحه قرار گیرد. اسید سولفوسالیسیلیک یک محیط اسیدی برای واکنش آماده می.کند در ضمن با بی کربنات سدیم برای تولید حباب ترکیب میشود که آن نیز به حلالیت نسبی قرص کمک می نماید. سپس نمک دیازونیوم با بیلی روبین روی صفحه ترکیب شده و یک رنگ آبی تا ارغوانی به عنوان محصول واکنش به دست می دهد. روش انجام آزمایش ۱ ۱۰ قطره از ادرار را روی صفحه چهارگوش مخصوص انجام تست که به همراه ایکتوتست عرضه می شود قرار دهید. -۲- یک قرص را در مرکز منطقه مرطوب بگذارید. -۳- یک قطره آب روی قرص بچکانید ۵ ثانیه صبر کنید سپس دومین قطره آب را روی قرص بچکانید بطوریکه قطره آب از قرص چکیده و به روی کاغذ برسد. ۴- در انتهای ۶۰ ثانیه رنگ صفحه در محدوده اطراف قرص را مشاهده میکنیم اگر رنگ آبی یا ارغوانی ظاهر شده بود جواب آزمایش مثبت است. تمامی رنگهای دیگر از جمله صورتی یا قرمز نشان دهنده جواب منفی می باشند. تست کف هدف : شناسایی بیلی روبین در ادرار اگر ادرار به رنگ زرد مایل به قهوه ای یا سبز مایل به زرد بود مشکوک به وجود بیلی روبین است ادرار را تکان دهید اگر کف زرد یا سبز مایل به زرد ظاهر شد بیلی روبین به احتمال زیاد وجود دارد بیلی روبین کشش سطحی ادرار را تغییر داده و در نتیجه بعد از تکان دادن کف ظاهر خواهد شد که رنگ زرد آن به علت پیگمان بیلی روبین است. تست آیودین هدف : شناسایی بیلی روبین در ادرار ۵ میلی لیتر از ادرار اسیدی شده را در لوله آزمایش می ریزیم روی آن می ۲ میلی لیتر از آیودین ۰/۷ درصد در الکل اتیلیک ۹۵ درصد اضافه کنیم. زمانیکه بیلی روبین در ادرار وجود داشته باشد حلقه سبز زمردی در محل اتصال دوفاز مایع تشکیل خواهد شد. این تست به مقدار ۱۰۰/۳ میلی گرم درصد بیلی روبین حساس است. نتایج را به صورت منفی یا مثبت گزارش می نماییم تست لکه هاریسون هدف : شناسایی بیلی روبین در ادرار در این آزمایش کلرید باریم با رادیکالهای سولفات موجود در ادرار ترکیب شده و رسوب سولفات باریم را تولید میکند. هر نوع پیگمان صفراوی موجود به این مولکولهای درشت می چسبد. سپس کلرید فریک موجود در حضور تری کلرواستیک اسید باعث اکسیده شدن بیلی روبین زرد رنگ به بیلی وردین سبر رنگ خواهد شد. این روش بسیار حساس است و گفته میشود که مقدار ۰/۱۰ ۰/۰۰۵ میلی گرم درصد بیلی روبین را مشخص می کند. معرف ها : . محلول فوشت که از ترکیب مواد زیر به دست می آید -۱ تری کلرواستیک اسید ۲۵ گرم -۲ محلول کلرورفریک ۱۰ درصد به میزان ۱۰ میلی لیتر آب مقطر ۱۰۰ میلی لیتر . محلول کلرید باریم ۱۰ درصد روش انجام آزمایش ۱- ۵ میلی لیتر از محلول کلرید باریم ۱۰ درصد را به ۱۰ میلی لیتر ادراراسیدی شده اضافه کنید. ۲- خوب مخلوط کرده و صاف کنید تا رسوب ایجاد شده جدا گردد. -٣- رسوب حاصل را روی کاغذ صافی پهن کنید و اجازه دهید تا خشک شود. ۴- یک قطره از محلول فوشت به رسوب اضافه نمائید. اگر بیلی روبین حضور داشته باشد رنگ سبز یا آبی - سبز به وجود خواهد آمد نتیجه به صورت مثبت یا منفی گزارش می گردد. از نوارهای آغشته شده به کلرید باریم که از نوع کاغذ صافی سفت تهیه میشود نیز میتوان استفاده نمود یک نوار از کاغذ آغشته به کلرید باریم را با ادرار مرطوب کرده و به قسمت مرطوب شده یک قطره از معرف فوشت را اضافه نمائید. Biochemistry قندو پروتئین شرایط و ملاحظات نمونه گیری • نمونه ادرار رندم، ۲۴ ساعته . حجم نمونه مورد نیاز ۵ میلی لیتر . معمولاً اسید کلریدریک ۶ مولار به عنوان ماده نگهدارند استفاده میشود. چنانچه نیاز به ادرار ۲۴ ساعته ،باشد ادرار را در طی مدت جمع آوری در یخچال نگه دارید. • در مورد نمونه ادرار ،رندم بهترین نمونه ادرار صبحگاهی میان جریان می باشد. حجم ادرار ۲۴ ساعته را یادداشت کنید. سدیم و پتاسیم شرایط و ملاحظات نمونه گیری • نوع نمونه قابل اندازه گیری ادرار ۲۴ ساعته یا رندم • حجم نمونه مورد نیاز ۵ میلی لیتر • نیازی به ناشتایی نمی باشد. ۲۵۰ میلی لیتر از اسید استیک ۵۰% به عنوان ماده نگهدارنده میتوانید اضافه کنید. • زمان شروع نمونه برداری را روی ظرف ادرار و برگه آزمایشگاه یادداشت نمایید. • در طی جمع آوری ادرار ۲۴ ساعته ، نمونه را داخل یخچال قرار گیرد. • نمونه ادرار را بلافاصله به آزمایشگاه بفرستید. کلسیم وفسفر شرایط و ملاحظات نمونه گیری . نمونه ادرار رندم، ۲۴ ساعته حجم نمونه مورد نیاز ۱۰ میلی لیتر • رعایت رژیم غذایی ۸۰۰ میلی گرم کلسیم در روز قبل از انجام آزمایش ضروری است. • در صورت استفاده از نگهدارنده اسیدکلردریک ۶ نرمال مناسب می باشد. . چنانچه نیاز به ادرار ۲۴ ساعته ،باشد ادرار را در طی مدت جمع آوری در یخچال نگهدارید. • در مورد نمونه ادرار ،رندم بهترین نمونه ادرار صبح گاهی میان جریان می باشد. • حجم ادرار ۲۴ ساعته را یادداشت کنید. اوره و کراتینین شرایط و ملاحظات نمونه گیری . نمونه ادرار رندم، ۲۴ ساعته . حجم نمونه مورد نیاز ۵ میلی لیتر معمولاً از اسید بوریک و یا تیمول به عنوان ماده نگهدارنده ادرار ۲۴ساعته استفاده میشود. . چنانچه نیاز به ادرار ۲۴ ساعته ،باشد ادرار را در طی مدت جمع آوری در یخچال نگهدارید. • در مورد نمونه ادرار ،رندم بهترین نمونه ادرار صبح گاهی میان جریان می باشد. البومین شرایط و ملاحظات نمونه گیری . نمونه ادرار رندم، ۲۴ ساعته . حجم نمونه مورد نیاز ۵ میلی لیتر . معمولاً داخل ظرف ادرار ۲۴ ساعته ،تولوئن تیمول و اسیدبوریک به عنوان نگهدارنده استفاده می شود. • چنانچه نیاز به ادرار ۲۴ ساعته ،باشد ادرار را در طی مدت جمع آوری در یخچال نگهدارید. . در مورد نمونه ادرار ،رندم بهترین نمونه ادرار صبحگاهی میان جریان می باشد. از حضور هرگونه عفونت حاد یا خونریزی سیستم ادراری که نتایج مثبت کاذب به دنبال دارد اطمینان حاصل کنید . اگر نمونه ادراری حاوی ترشحات واژینال با خون است باید یک نمونه تمیز یا وسط ادرار جمع آوری شود. ACR formula اسیداوریک شرایط و ملاحظات نمونه گیری . نمونه ادرار رندم، ۲۴ ساعته . حجم نمونه مورد نیاز ۵ میلی لیتر • نیاز به ناشتایی ،ندارد اما از رژیم غذایی غنی از پورینها قبل از جمع آوری نمونه اجتناب گردد. • معمولاً از اسید بوریک به عنوان نگهدارنده استفاده می شود. . چنانچه نیاز به ادرار ۲۴ ساعته باشد ادرار را در طی مدت جمع آوری در یخچال نگهدارید. • در مورد نمونه ادرار ،رندم بهترین نمونه ادرار صبح گاهی میان جریان می باشد. کاتکول امینها شرایط و ملاحظات نمونه گیری . نمونه ادرار رندم، ۲۴ ساعته حجم نمونه مورد نیاز ۵ میلی لیتر روز پیش از جمع آوری ادرار ۲۴ ساعته بیمار باید از مصرف قهوه،چای موز ،شکلات کاکائو مرکبات و غذای وانیل دار و آسپرین اجتناب کند. معمولا برای ادرار ۲۴ ساعته ۲۵ میلی لیتر اسیدکلریدریک یا اسید استیک ۵۰% به عنوان نگهدارنده استفاده می شود. . چنانچه نیاز به ادرار ۲۴ ساعته ،باشد ادرار را در طی مدت جمع آوری در یخچال نگهدارید. . در مورد نمونه ادرار ،رندم بهترین نمونه ادرار صبح گاهی میان جریان می باشد. سیترات شرایط نگهداری . در صورت درخواست جمع آوری ادرار ۲۴ ساعته نمونه را باید در یخچال نگاه داشت و یا طی زمان جمع آوری با نگهدارنده نگهداری نمود. • ظرف ادرار را در مدت جمع آوری نمونه ادرار ۲۴ ساعته در جای ،خشک تمیز و خنک نگهدارید.
